胱抑素CElisa試劑盒測(cè)定方法比較
1、胱抑素CElisa試劑盒概述
胱抑素CElisa試劑盒在雞蛋清中分離純化得到高純度的半蛋白酶抑制劑（cysteine proteinase inhibitor ,CPI） ,后被命名為胱抑素C.它由122 個(gè)氨基酸組成，帶正電荷，等位點(diǎn)為9.3,是一種堿性非糖化的低分子蛋白，相對(duì)分子質(zhì)量為13300.胱抑素C 是半蛋白酶抑制劑家族中的一員，編碼血清胱抑素 C的基因位于20 號(hào)染色體短臂，長(zhǎng)約615kb,屬于管家基因，能在所有有核細(xì)胞中以恒定的速率轉(zhuǎn)錄表達(dá)。胱抑素C 是一種分泌性蛋白，廣泛存在于各種體液中，如腦脊液、唾液、尿液、精液等， 其中精液和腦脊液中的濃度zui高， 尿液中zui低[1],胱抑素C 能夠自由通過(guò)腎小球， 并且由腎小管重吸收后降解，生理情況下幾乎沒(méi)有影響胱抑素C穩(wěn)定的因素。胱抑素具有產(chǎn)生速率恒定、只能通過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)排泄，在腎小管內(nèi)*被重吸收降解[2],這一特點(diǎn)使得血清胱抑素 C成為引人注目的腎臟腎小球?yàn)V過(guò)率（glomerular filtration rate. GFR）的替代標(biāo)志物。
2、胱抑素CElisa試劑盒測(cè)定
2.1 胱抑素CElisa試劑盒測(cè)定方法比較
胱抑素C的測(cè)定目前有單向免疫擴(kuò)散法（RID）、放射免疫法（RIA）、時(shí)間分辨熒光免疫法（ TRFIA）、酶免疫測(cè)定法（ EIA）、乳膠顆粒增強(qiáng)免疫比濁法（PETIA）等。
從測(cè)定速度方面講，RID法、RIA法、TRFIA法、ELISA法均較耗時(shí)，PETIA法則只需幾分鐘就可完成整個(gè)分析過(guò)程。從靈敏度而言，RID法zui差，而RIA法、TRFIA法、ELISA法均優(yōu)于PETIA法。RIA法存在放射性污染，F(xiàn)TFIA法需要較貴的儀器，ELISA法無(wú)法適應(yīng)臨床大批量的標(biāo)本的需求。PETIA法可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，雖檢測(cè)靈敏度差些，但可達(dá)到150ug/L,遠(yuǎn)遠(yuǎn)底低于健康人的下限，可滿足臨床的要求[3].
2.2胱抑素CElisa試劑盒干擾因素分析
大量國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)血清胱抑素 C受影響因素較小，Gokkusu等認(rèn)為其不受性別，肌肉量的變化和慢性炎癥的影響是一種理想的內(nèi)源性標(biāo)志物[4],余洪立報(bào)導(dǎo)PETIA法測(cè)定血清胱抑素 C 當(dāng)<150μmol/ L ,Hb < 112g/ L ,TG< 815mmol/ L時(shí) ,結(jié)果不受干擾[3].
目前對(duì)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)血清胱抑素 C測(cè)定有影響的因素較少，Newman認(rèn)為甾體類(lèi)激素治療可能對(duì)血清胱抑素 C測(cè)定有影響，但未說(shuō)明有什么影響[5].向禮賢報(bào)導(dǎo)惡性腫瘤患者（如：結(jié)直腸癌）血清胱抑素 C可以升高，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎用非甾體類(lèi)抗炎藥和抗風(fēng)濕類(lèi)藥物治療病人血清胱抑素 C水平升高[1].
3、胱抑素CElisa試劑盒臨床應(yīng)用
3.1胱抑素CElisa試劑盒在反映腎臟腎小球?yàn)V過(guò)率方面的應(yīng)用
由于血清胱抑素 C以恒定速率釋放入血，*從腎小球?yàn)V過(guò)，在腎小管中幾乎全被吸收，上皮細(xì)胞將其*分解代謝，它既不返回血液循環(huán)，也不分泌至腎小管，只經(jīng)腎臟排除，不受性別、飲食、炎癥和體質(zhì)量等因素的影響，因此反映GFR時(shí)具有*的優(yōu)勢(shì)。
3.2 在兒科疾病中的應(yīng)用
由于小兒肌肉量少， 血肌酐（SCr ）的測(cè)定結(jié)果很低， 致使SCr測(cè)定的度差， 因此， 4 歲以下兒童（SCr 的參考值2. 0——4. 0mg/ L） 難于通過(guò)用SCr 來(lái)測(cè)定有較小變化腎臟腎小球?yàn)V過(guò)率。另一方面， 1 歲以上兒童血清或血清胱抑素 C濃度已很穩(wěn)定，近于成人水平。所以血清胱抑素 C是反映兒童GFR 受損的靈敏標(biāo)記物，更適應(yīng)兒童腎病患者的診斷。
3.3 在糖尿病中的應(yīng)用
約三分之一的糖尿病患者發(fā)展為腎衰需要腎透析，必須以可靠的腎臟腎小球?yàn)V過(guò)率清除率來(lái)評(píng)價(jià)糖尿病患者的腎功能狀況。臨床通常以檢測(cè)SCr來(lái)評(píng)估GFR ,而SCr對(duì)輕度的腎功能損傷缺乏足夠的靈敏度并存在盲區(qū)，血清胱抑素 C能對(duì)輕度的腎功能損傷反應(yīng)靈敏，并對(duì)檢測(cè)GFR 有較好的相關(guān)性，所以在糖尿病患者中定期檢測(cè)血清胱抑素 C可以動(dòng)態(tài)觀察病情的發(fā)展。
3.4 在中的應(yīng)用
對(duì)于的病人很可能導(dǎo)致腎功能損害，因?yàn)樗幬飳?duì)腎小管有一定的損傷，當(dāng)腎功能受到損害時(shí)，藥物更容易積蓄并導(dǎo)致多方面的毒副作用，因此對(duì)進(jìn)行藥物治療的病人及時(shí)關(guān)注其腎臟功能的狀況，以適當(dāng)調(diào)整藥物劑量。一些研究[1——3]一致地認(rèn)為對(duì)病人檢測(cè)血清胱抑素 C比檢測(cè)SCr更有意義。
3.5 在心血管疾病中的應(yīng)用[6]
胱抑素C 參與了心血管系統(tǒng)諸多的病理、生理過(guò)程，它的作用機(jī)制涉及抗炎、抑制酶原與激素前體的活性等，而且由于它產(chǎn)生的恒定性，有可能在某些心血管疾病中成為診斷與檢測(cè)的分子指標(biāo)。
3.6 在腎移植中的應(yīng)用
腎臟腎小球?yàn)V過(guò)率可作為衡量急、慢性排斥對(duì)免疫抑制藥物的腎毒性觀察指標(biāo)之一，用一敏感、可靠和簡(jiǎn)便的指標(biāo)來(lái)檢測(cè)GFR 的變化對(duì)移植腎患者是極為有效的診斷工具，而胱抑素 C 無(wú)疑是比肌酐更為敏感的GFR的檢測(cè)指標(biāo)。
3.7 在診斷腎源性胸水方面的應(yīng)用
引起胸水的原因很多，如腎源性，肝源性，心源性，炎癥，腫瘤及內(nèi)分泌代謝等。從多種病因中鑒別出腎源性胸水往往比較困難。Donej等用同一種方法同時(shí)測(cè)定血清和胸水中的血清胱抑素 C的濃度，發(fā)現(xiàn)在漏出性胸水中，血清血清胱抑素 C和胸水血清胱抑素 C均明顯升高，且兩者比值接近1.0,為腎源性胸水（r=0.954），而非其他原因所致的胸水。腎功能不全患者合并胸水，若為滲出液，兩者均明顯升高，尿毒癥性胸膜炎可能性大。兩者比值很高或很低，可以排除腎源性胸水的診斷。
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