LNCaP人前列腺癌細胞細胞系
英文名稱 | LNCaP | 規(guī)格 | 1×106cells |
種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 貨號 | E1898 |
用途 | 僅供科研研究實驗 | 貨期 | 現(xiàn)貨 |
別稱 LNCaP-Clone-FGC; LNCaP.FGC; LNCaP-FGC; LNCaP FGC; LNCaP-ATCC
種屬 人類
年齡（性別） 男性，50歲
組織來源 前列腺；左鎖骨淋巴結(jié)癌轉(zhuǎn)移灶
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
背景描述 人前列腺癌細胞LNCaP clone FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結(jié)針刺活檢中分離，該患者經(jīng)確診為前列腺癌轉(zhuǎn)移。LNCaP clone FGC細胞對5-α-二氫睪酮(生長調(diào)節(jié)子和酸性磷酸脂酶產(chǎn)物)有響應(yīng)。 生物安全等級 1 生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例 1:3-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時間 ~32-36小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 致瘤性 Yes, in soft agar.Yes, the cells are tumorigenic in nude mice. 受體表達情況 androgen receptor, positive;estrogen receptor, positive 基因表達情況 human prostatic acid phosphatase; prostate specific antigen 注意事項 1）該細胞并不形成一致的單層，而是形成集落。（2）該細胞會使培養(yǎng)基快速變酸，且生長緩慢，故傳代后 48 小時內(nèi)不應(yīng)擾動；（3）普通TC處理的培養(yǎng)瓶或皿不能使細胞很好的貼壁，培養(yǎng)難度較高，需使用 Corning 的 cellbind 細胞培養(yǎng)瓶（貨號是 3289），或者使用多聚-L-賴氨酸溶液（貨號 PB180523）包被過的培養(yǎng)皿； （4）在細胞運輸途中，多數(shù)細胞會從培養(yǎng)瓶底分離，大片懸浮在培養(yǎng)基中，按照收貨注意事項處理即可恢復正常。 保藏機構(gòu) ATCC; CRL-1740 BCRC; 60088 BCRJ; 0149 ECACC; 89110211 |
1)復蘇細胞：將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細胞情況而定)，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3)細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
人肺微血管平滑肌 | DMS 114人小細胞肺癌細胞 |
人主動脈內(nèi)皮細胞 | HBE135-E6E7人支氣管上皮細胞 |
大鼠骨骼肌細胞 | HEL人紅白細胞白血病細胞 |
人臍動脈平滑肌細胞 | HMEC-1人微血管內(nèi)皮細胞株 |
小鼠大隱靜脈內(nèi)皮細胞 | HUT-78人T淋ba細胞白血病細胞 |
大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細胞 | Karpas-299人間變性大細胞淋ba瘤細胞 |
人主動脈平滑肌細胞 | LOVO+LUC人結(jié)直腸癌細胞熒光素酶標記 |
小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞 | MDA-MB-436人乳腺癌細胞 |
大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞 | MT-4人急性淋ba母細胞白血病細胞 |
人臍靜脈內(nèi)皮細胞 | NCI-H292人肺癌細胞(淋ba結(jié)轉(zhuǎn)移) |
人臍動脈內(nèi)皮細胞 | NPC/HK-1人鼻咽癌細胞 |
小鼠滑膜細胞 | ProPakA.6人胚腎細胞 |
大鼠滑膜細胞 | LNCaP人前列腺癌細胞細胞系sh-sy5y人神經(jīng)母細胞瘤細胞 |
人臍靜脈平滑肌細胞 | SK-OV-3人卵巢癌細胞 |
小鼠骨骼肌細胞 | SW620人結(jié)直腸腺癌細胞 |
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否*揮發(fā)，細胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。.觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。
9. 注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
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