牛原代外周血白原代細胞
商品屬性：
規(guī)格 | 5×105cells/T25或1mL凍存管 | 貨號 | EY-XY4113 |
種屬來源 | 牛 | 組織來源 | 外周血 |
生長特性 | 細胞為混合體系，大部分懸浮生長，小量貼壁生長 | 形態(tài)特征 |
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形態(tài)：
培養(yǎng)基：牛外周血白細胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)環(huán)境：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃
傳代特征：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)
細胞基本屬性：
種屬來源：牛
組織來源：外周血外周血
生長特性：細胞為混合體系，大部分懸浮生長，小量貼壁生長
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次
消化液：
產(chǎn)品貨期：現(xiàn)貨，1周左右
運輸方式：T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應限制：僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹：:白細胞(英文名:leukocyte，white blood cell，簡稱:WBC)，舊稱白血球。血液中的一類細胞。白細胞經(jīng)復合染料染色后，可根據(jù)其形態(tài)差異和細胞質(zhì)內(nèi)有無的顆粒可分粒細胞和無粒細胞。無粒細胞又分為單核細胞與淋巴細胞兩種。血液中有三種類型的淋巴細胞：B細胞、T細胞和NK細胞。粒細胞胞質(zhì)內(nèi)含有嗜色顆粒，分為中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞。在顯微鏡下可以看到，血細胞中體積比較大、數(shù)量比較少。具有細胞核。白細胞能吞噬異物產(chǎn)生抗體，在機體損傷治愈、抗御病原的入侵和對疾病的免疫方面有重要作用。
原代細胞培養(yǎng)的主要步驟包括：
?一、剝離組織，去除外膜、結(jié)締組織等?：將組織從動物體中取出，并去除可能存在的外膜或結(jié)締組織等雜質(zhì)。
二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?：使用生理鹽水或其他適當?shù)木彌_液洗滌組織，然后將其剪成約1mm大小的小塊。
三、?用0.1%～0.2%的消化?：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩沖液中，進行消化。消化時間可根據(jù)具體實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。
?四、吹打分散后，過濾、計數(shù)?：將消化后的細胞吹打到一個離心管中，然后過濾、計數(shù)。
五、?按30萬/毫升分瓶培養(yǎng)?：將計數(shù)后的細胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)操作：
收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)
傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法：
1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4.待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
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