公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞；LWnt-3A | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63910 |
細(xì)胞名稱 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞；LWnt-3A
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: L-M(TK-)cells(ATCCCCL-1.3)用Wnt-3A表達(dá)載體轉(zhuǎn)染并在含G418的培養(yǎng)基中篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株。Wnt-3A基因編碼一個(gè)有變異的信號(hào)功效分泌性糖蛋白。Wnt基因控制胚胎發(fā)過(guò)程中的許多模式形成和生長(zhǎng)事件。這些細(xì)胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白。它們是目前Wnt-3A條件培養(yǎng)基的好來(lái)源。由于這種條件培養(yǎng)基還包含Wnt-3A蛋白外的其他因子，對(duì)于涉及Wnt-3A條件培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)有必要用其來(lái)源細(xì)胞株(ATCCCRL-2648)作對(duì)照。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；0.4mg/mlG-418
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況: PN5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
唾液結(jié)合Ig樣凝集素7檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人類結(jié)腸癌細(xì)胞系；DXH-1形態(tài)特性: 上皮樣Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 7
森林腦炎IGG抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株；11F11E4形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣forest encephalitis IgG antibody
森林腦炎IGM抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株；A12D3形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣forest encephalitis IgM antibody
狂犬病 IGM檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠正常氣管上皮細(xì)胞；MNTEC/HL-007形態(tài)特性: 上皮樣Rabies virus IgM
愛潑斯坦-巴爾病 IGM檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株；FF/7A8形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Epstein Barr virus IgM
二氫脫氫酶檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株；TAP/5F4形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣dehydrogenas
8-羥基(脫氧)檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株；C12D1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣8-oxoguanine glycosydase
可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人正常角膜上皮細(xì)胞；HNCEC/HL-008形態(tài)特性: 上皮樣Soluble Vascuoar endothelial cell growth factor receptor2
肌肉肌激酶檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人正常眼瞼上皮細(xì)胞；HNEEC/HL-014形態(tài)特性: 上皮樣Creatine kinase M-type
可溶性血小板膜糖蛋白Ⅵ檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人正常上皮細(xì)胞；HNVEC/HL-016形態(tài)特性: 上皮樣soluble platelet membrane glycoprotein Ⅵ
序列相似家族150成員A檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人正常主氣管上皮細(xì)胞；HNTEC/HL-013形態(tài)特性: 上皮樣Family With Sequence Similarity 150, Member A
GFAP的降解產(chǎn)物檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人正常眼瞼上皮細(xì)胞；HNEEC/HL-015形態(tài)特性: 上皮樣GFAP-BDP
Ⅰ型細(xì)胞質(zhì)膜蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠正常食管上皮細(xì)胞；MNEEC/HL-009形態(tài)特性: 上皮樣HTI56
腦膜炎奈瑟菌IgM抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 大鼠正常皮膚角質(zhì)細(xì)胞；RNSK/HL-010形態(tài)特性: 上皮樣neisseria meningitidis IgM antibody
唾液褪黑素檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 大鼠正常食管上皮細(xì)胞；RNEEC/HL-011形態(tài)特性: 上皮樣Melatonin direkt Saliva
尿褪黑素硫鹽檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 大鼠正常食管上皮細(xì)胞；RNEEC/HL-012形態(tài)特性: 上皮樣Urine melatonin sulfate
丁肝抗原檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 乙型肝炎病全基因組轉(zhuǎn)基因人肝細(xì)胞系；HL02-H1形態(tài)特性: 上皮樣HDV-Ag
小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞；LWnt-3A銀杏內(nèi)酯J107438-79-9中文別名：白果苦內(nèi)酯J
英文名：Ginkgolide J
CAS登錄號(hào)：107438-79-9
分子式：C20H24O10
分子量：424.39
分子結(jié)構(gòu)：
外觀：結(jié)晶
規(guī)格：20mg/支
純度：≥ 98%
用途：用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來(lái)源：銀杏科Ginkgo biloba Leaf P.E.
熔點(diǎn)：322℃
旋光度：-11.8° (c=1，乙醇)
藥理藥效：存在于銀杏科植物銀杏(Ginkgo biloba L.)的外種皮中。本品有較強(qiáng)的殺菌或抑菌作用，對(duì)枯草桿菌、大腸桿菌、酵母菌、金黃色葡萄球菌、痢疾桿菌、綠膿桿菌等均有作用。
貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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