服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 足馬杜拉分枝菌探針法PCR熒光定量試劑盒 |
英文名稱 | Madurella mycetomatis |
貨號 | EY00P9082 |
它具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化，靈敏性高。
3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高，引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
BOC-D-鹽酸鹽生脈提取物（標(biāo)準(zhǔn)品） 4,5-Difluorophthalonitrile
BOC-D-鹽酸鹽勝紅薊（標(biāo)準(zhǔn)品） 4-Hexyloxyphthalonitrile
Nα-BOC-D-鹽酸鹽一水合物圣草次苷（標(biāo)準(zhǔn)品） 4-Hydroxyphthalonitrile
Boc-Arg(Mts)-OH·CHA圣草酚(標(biāo)準(zhǔn)品） 4-Nitrophthalonitrile
Boc-Arg(Mts)-OH·CHA蓍草（標(biāo)準(zhǔn)品） 3-Nitrophthalonitrile
BOC-硝基-L-十七碳酸甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品） Phthalonitrile
BOC-硝基-L-石菖蒲（標(biāo)準(zhǔn)品） 4-Propoxyphthalonitrile
BOC-硝基-L-石吊蘭（標(biāo)準(zhǔn)品） 4-Pentyloxyphthalonitrile
N-叔丁氧羰基-N'-甲苯磺?；?-L- Tetrafluorophthalonitrile
N-叔丁氧羰基-N'-甲苯磺酰基 -L- 石斛酚（標(biāo)準(zhǔn)品） 1,2-Naphthalenedicarbonitrile
N-叔丁氧羰基-N'-甲苯磺?；?-L- 石斛堿（標(biāo)準(zhǔn)品） 1,4,5,6-Tetrahydro-5,6-dioxo-2,3-pyrazinedicarbonitrile
BOC-對磺酰-D-石見穿（標(biāo)準(zhǔn)品） 1-Aza-15-crown 5-Ether
BOC-對磺酰-D-石椒草（標(biāo)準(zhǔn)品） 1-Aza-18-crown 6-Ether
BOC-對磺酰-D-石榴皮（標(biāo)準(zhǔn)品） 1-Aza-12-crown 4-Ether
叔丁氧羰基-N-beta-三苯甲基-L-天門冬酰石榴皮鞣素；安石榴林（標(biāo)準(zhǔn)品） 4'-Acetylbenzo-15-crown 5-Ether
足馬杜拉分枝菌探針法PCR熒光定量試劑盒基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)柯伊利素-7-O-葡萄糖苷,野決明苷 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR500ML
基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)山柰酚-3-O-蕓香糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR500ML
基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鈉一水物 質(zhì)量規(guī)格：>98%(T),BR500ML
S100鈣結(jié)合蛋白(S100)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鈉一水物 質(zhì)量規(guī)格：0.98500ML
角蛋白1(KRT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鈉(標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR500ML
胰島素降解酶(IDE)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格：0.98500ML
Lacritin蛋白(LACRT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格：0.98500ML
皮敵菌素(DCD)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)(標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR500ML
熒光定量PCR服務(wù)：
公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。
1、熒光定量PCR服務(wù)要求：
（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。
（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。
（03）請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等
2、熒光定量PCR操作程序
（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。
（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。
（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。
（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。
3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：
我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。
運(yùn)輸及保存： 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為12個月。
自備試劑：樣品 RNA。
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
枝頂孢霉探針法PCR熒光定量試劑盒 | Acremonium strictum | EY00P8638 |
使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品，設(shè)置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?0μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝，該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板，省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個PCR 管，其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照（用水做模板），6個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+4 個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1個用于PCR陽性對照（用第4號管的陽性對照稀釋液做模板）。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
產(chǎn)品及特點(diǎn)：
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
4-乙氧基-2,3-二氟黃芪黃酮標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 ASTRAGALUS FLAVONOID STANDARDS KIT(SH) Cilostazol
2-溴-5-(2-辛基十二烷基)噻吩黃芪皂苷標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 ASTRAGALUS SAPONIN STANDARDS KIT(SH) Cisplatin
3-[2-(Boc-氨基)乙基]氮雜環(huán)丁烷鹽酸鹽黃芪皂苷標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 ASTRAGALUS SAPONIN STANDARDS KIT(SH) Cisplatin
3-Boc-氨甲基氮雜環(huán)丁烷鹽酸鹽朝鮮薊標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 ARTICHOKE STANDARDS KIT(P) Cisplatin
1H-吡唑基[3,4-B]吡啶-3-羧酸朝鮮薊標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 ARTICHOKE STANDARDS KIT(P) Cladribine
N-Boc-3-溴-氮雜環(huán)丁烷棗標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 JUJUBE STANDARDS KIT(P) Clarithromycin
1-烯基環(huán)磺酰氯棗標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 JUJUBE STANDARDS KIT(P) Clarithromycin
3-酸基-5-氟-4-甲酸常春藤標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 IVY STANDARDS KIT(SH) Clindamycin Phosphate
2,4-二氟-5-溴苯山楂標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 HAWTHORN STANDARDS KIT(P) Clindamycin Phosphate
1-溴-3-氯-4-乙氧基-2-氟苯山楂標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 HAWTHORN STANDARDS KIT(P) Clofarabine
2,6,7-三氯-3-三氟甲基喹喔啉藤黃標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GARCINIA STANDARDS KIT(P) Clotrimazole
2-氯吡-3-羧酸馬栗樹標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 HORSE CHESTNUT STANDARDS KIT(SH) Clotrimazole
4-溴-2-氯-6-氟苯甲哈爾滿生物堿標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 HARMANE ALKALOIDS STANDARDS KIT(RG) Colchlcine
5-氯-3-羥基異噻唑生姜標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GINGER STANDARDS KIT(P) Colchlcine
3-氟-4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯生姜標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GINGER STANDARDS KIT(P) Colistin Sulphate
枝頂孢霉探針法PCR熒光定量試劑盒趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1(CCL3L1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品¥600.00
紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格：純度>99,USP100mL
紅細(xì)胞生成素(EPO)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品100mL
紅細(xì)胞生成素(EPO)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格：> 98%,水合物標(biāo)準(zhǔn)品100mL
E選擇素(SELE)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格：純度> 98.5%,BR,二水合物100mL
E選擇素(SELE)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：純度> 98%100mL
凋亡相關(guān)因子(FAS)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)醋酸增血壓素 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品100mL
凋亡相關(guān)因子(FAS)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)醋酸增血壓素 質(zhì)量規(guī)格：>98% 100mL
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