細(xì)胞名稱 SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞；WI38/VA13
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞1964年建系，源自3個(gè)月胎齡的女性胚胎的肺成纖維細(xì)胞，經(jīng)SV-40轉(zhuǎn)化。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法: 1:2～1:10傳代，每周換液2次
傳代情況: C2
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養(yǎng)法（-）
公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞；WI38/VA13 | 貼壁生長 | EY-X63858 |
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
死骨片1-泛素結(jié)合蛋白P62檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞；LWnt-3A形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞SQSTM1-p62
轉(zhuǎn)錄激活因子MYB檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠間質(zhì)細(xì)胞；TM3形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞c-Myb
醌NADH脫氫酶1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠成纖維細(xì)胞；NCTCclone929[Lcell,L-929,derivativeofStrainL]形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞NAD (P)H Dehydrogenase, Quinone 1
CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 非洲綠猴腎細(xì)胞；VEROC1008(E6)形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞Enhancer Binding Protein Alpha
淋巴增強(qiáng)因子-1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 非洲綠猴腎細(xì)胞（SV40轉(zhuǎn)化）；COS-1[COS1]形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞Lymphoid enhancer-binding factor 1
Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 狗腎細(xì)胞；SuperTube形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞Runt-related transcription factor 1
白細(xì)胞介素36γ檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 大鼠肝細(xì)胞；BRL3A形態(tài)特性: Interleukin 36γ
受體酪氨激酶c-Met檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤(抗CD3)；OKT3形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣c-Met
血清淀粉樣蛋白A4檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雞胚成纖維細(xì)胞；UMNSAH/DF-1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞Serum amyloid A4
信號素3E檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人肺癌細(xì)胞株；MSTO-211H形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣SEMA3E
血管緊張素Ⅲ檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞；SK-NEP-1形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞angiotension Ⅲ
血管緊張素Ⅳ檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人膀胱上皮永生化細(xì)胞；SV-HUC-1形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞angiotension Ⅳ
血管緊張素Ⅴ檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人骨肉瘤細(xì)胞；MNNG/HOSCl#5[R-1059-D]形態(tài)特性: angiotension Ⅴ
血管緊張素Ⅵ檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人纖維肉瘤；HT-1080形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞angiotension Ⅵ
血管緊張素Ⅶ檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；SW480[SW-480]形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞angiotension Ⅶ
CXC趨化因子配體10檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人前列腺癌細(xì)胞；LNCaPcloneFGC形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞CXC-chemokine ligand 10
乙醛氧化酶1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞；SW1116形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞Aldehyde Oxidase 1
SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞；WI38/VA1320(R)原人參三醇1453-93-6英文名：20(R)Protopanaxatriol
英文別名：(20R)-5α-Dammar-24-ene-3β,6α,12β,20-tetrol;(20R)-Dammar-24-ene-3β,6α,12β,20-tetrol;(20R)-Protopanaxatriol
CAS登錄號：1453-93-6
分子式：C30H52O4
分子量：476.73
分子結(jié)構(gòu)：
外觀：白色粉末
規(guī)格：20 mg/支
純度：≥ 98%
用途：用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來源：五加科植物人參Panax ginseng C. A. Mey.的干燥根
溶解性：可溶于、、DMSO等溶劑。
熔點(diǎn)：261-263℃
藥理藥效：大補(bǔ)元?dú)?，滋補(bǔ)強(qiáng)壯，安神益智，生津，復(fù)脈固脫等功效。
貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
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